荧光淬灭

来自testwiki
跳转到导航 跳转到搜索
紫外激光(左)照射溶解在水中的两个奎宁样品。右侧样品发出一般奎宁的蓝色荧光,左侧样品中因为含有氯离子,可淬灭奎宁的荧光,因此左侧样品不会发出明显的荧光。

荧光淬灭Template:Lang-en)是指荧光物质的荧光强度降低的任何过程。许多过程都会导致淬灭现象,例如激发态反应、能量转移、配合物的形成和碰撞淬灭。氧分子、碘离子丙烯酰胺都是常见的化学淬灭剂[1]氯离子是常见的奎宁淬灭剂[2][3][4]

淬灭被用于制造Template:Le传感器,例如氧对某些配合物的淬灭效应可以用于测量溶液中的氧饱和度;淬灭是荧光共振能量转移(FRET)分析技术的基础[5][6][7];特定标靶分子结合时的淬灭与去淬灭效应可用作光学造影剂 [8][9];许多染料有自淬灭现象,导致荧光显微镜的蛋白质-染料偶联物的亮度降低[10];或是用作检测蛋白酶解传感器[11]

淬灭机理

供体发射和受体吸收的光谱产生重叠

荧光共振能量转移

Template:Main 荧光淬灭可以用多种机制解释,其中的FRET是动态淬灭机制,供体与受体通过非辐射的方式转移能量。因为能量转移的过程基于二者的跃迁偶极间的经典偶极-偶极相互作用,因此极其依赖于供体-受体间的距离R,以E∝1/R6的效率下降[12],通常FRET过程在100 Å的距离内发生。FRET的过程还取决于供体-受体的重叠(如图)以及跃迁偶极矩的相对取向。

德克斯特电子转移

Template:Main Template:Tsl(或称为德克斯特电子交换、碰撞能量转移等)是另一种动态淬灭机制[13],同样此过程依赖于供体和受体间的距离,能量转移速率由下式所示,此过程通常在10 Å的距离内发生[14],式中r是供体与受体间的距离,LP是不易由实验得到的常量,J是重叠光谱的积分[15]

kETP2Jexp[2rL]

激基配合物

Template:Main 激发态配合物的形成过程是第三种动态淬灭过程。

静态与动态淬灭机理的比较

静态淬灭

剩余的能量转移机理是静态淬灭,静态淬灭发生在基态的荧光分子与淬灭剂通过结合形成配合物时,即激发发生之前。静态淬灭形成的配合物会失去荧光性。

碰撞淬灭

激发态的荧光基团与淬灭剂原子或分子碰撞时,以无辐射跃迁的方式回到基态,此种淬灭过程称为碰撞淬灭。

参考文献

Template:Reflist

  1. Acrylamide and iodide fluorescence quenching as a structural probe of tryptophan microenvironment in bovine lens crystallins. Phillips SR, Wilson LJ, Borkman RF. Curr Eye Res. 1986 Aug;5(8):611-9.
  2. Fluorescence experiments with quinine James E. O'Reilly J. Chem. Educ., 1975, 52 (9), p 610 Template:DOI
  3. Photophysics in a disco: Luminescence quenching of quinine LouAnn Sacksteder , R. M. Ballew , Elizabeth A. Brown , J. N. Demas , D. Nesselrodt and B. A. DeGraff J. Chem. Educ., 1990, 67 (12), p 1065 Template:DOI
  4. Halide (Cl-) Quenching of Quinine Sulfate Fluorescence: A Time-Resolved Fluorescence Experiment for Physical Chemistry Jonathan H. Gutow J. Chem. Educ., 2005, 82 (2), p 302 Template:DOI
  5. Template:Cite book
  6. Template:Cite journal
  7. Template:Cite journal
  8. Template:Cite journal
  9. Template:Cite journal
  10. Template:Cite journal
  11. Template:Cite journal
  12. Template:Cite web
  13. Template:GoldBookRef
  14. Template:Cite web
  15. Template:GoldBookRef