微分相位對比
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微分相位對比(Differential Phase Contrast, DPC)是一種基於不對稱照明的光學顯微技術,通過檢測樣品的相位梯度信息,生成高對比度的邊元增強圖像。該技術無需化學染色即可觀測透明或低對比樣品,廣泛應用於生物醫學與材料科學領域。
技術原理
基本概念
DPC利用不對稱照明(如單側光源)檢測樣品的相位梯度,其數學模型可表示為: 其中為相位延遲,為照明方向向量。[1]
與其他技術的比較
| 特性 | DPC(微分相位對比) | DIC(微分干涉對比) | iDPC(整合微分相位對比) |
|---|---|---|---|
| 成像目標 | 相位梯度(邊緣增強) | 相位梯度(邊緣增強) | 絕對相位分布 |
| 數據來源 | 單一方向照明 | 物理棱鏡分光 | 多方向照明積分 |
| 圖像效果 | 邊緣清晰,相位不完整 | 邊緣清晰,相位不完整 | 完整相位分布,細節保留 |
| 應用場景 | 快速表面形貌觀察 | 高分辨率表面形貌觀察 | 透明樣本定量分析 |
發展歷史
- 1984年:Template:Link-en與Template:Link-en首次提出DPC技術,應用於掃描光學顯微鏡。[1]
- 2000年代:DPC被引入寬場顯微鏡,用於活細胞成像。[2]
- 2010年代:結合計算成像算法,DPC的分辨率與對比度進一步提升。[3]
應用領域
生物醫學
- 活細胞成像:觀測細胞邊緣與內部結構,無需染色。[4]
- 組織病理學:快速篩查病理切片中的異常細胞。
材料科學
- 表面形貌分析:測量薄膜與塗層的表面粗糙度。[5]
- 半導體檢測:定位集成電路的奈米級缺陷。
技術優勢與限制
| 優勢 | 限制 |
|---|---|
| • 無需標記,避免光毒性 • 快速成像,適合動態觀測 • 兼容常規顯微鏡升級 |
• 僅檢測相位梯度,無法重建絕對相位 • 對厚樣品(>20μm)成像效果較差 • 光源不對稱性影響圖像均勻性 |
參見
參考文獻
外部連結
- ZEISS DPC技術介紹(官方技術白皮書)
- Template:Youtube