微分相位對比

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微分相位對比(Differential Phase Contrast, DPC)是一種基於不對稱照明的光學顯微技術,通過檢測樣品的相位梯度信息,生成高對比度的邊元增強圖像。該技術無需化學染色即可觀測透明或低對比樣品,廣泛應用於生物醫學與材料科學領域。

技術原理

基本概念

DPC利用不對稱照明(如單側光源)檢測樣品的相位梯度,其數學模型可表示為: IDPCϕ𝐒 其中ϕ為相位延遲,𝐒為照明方向向量。[1]

與其他技術的比較

特性 DPC(微分相位對比) DIC(微分干涉對比) iDPC(整合微分相位對比)
成像目標 相位梯度(邊緣增強) 相位梯度(邊緣增強) 絕對相位分布
數據來源 單一方向照明 物理棱鏡分光 多方向照明積分
圖像效果 邊緣清晰,相位不完整 邊緣清晰,相位不完整 完整相位分布,細節保留
應用場景 快速表面形貌觀察 高分辨率表面形貌觀察 透明樣本定量分析

發展歷史

  • 1984年:Template:Link-enTemplate:Link-en首次提出DPC技術,應用於掃描光學顯微鏡。[1]
  • 2000年代:DPC被引入寬場顯微鏡,用於活細胞成像。[2]
  • 2010年代:結合計算成像算法,DPC的分辨率與對比度進一步提升。[3]

應用領域

生物醫學

  • 活細胞成像:觀測細胞邊緣與內部結構,無需染色。[4]
  • 組織病理學:快速篩查病理切片中的異常細胞。

材料科學

  • 表面形貌分析:測量薄膜與塗層的表面粗糙度。[5]
  • 半導體檢測:定位集成電路的奈米級缺陷。

技術優勢與限制

優勢 限制
• 無需標記,避免光毒性
• 快速成像,適合動態觀測
• 兼容常規顯微鏡升級
• 僅檢測相位梯度,無法重建絕對相位
• 對厚樣品(>20μm)成像效果較差
• 光源不對稱性影響圖像均勻性

參見

參考文獻

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外部連結

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